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总蛋白提取试剂盒图片
产品货号:
QN1068
中文名称:
总蛋白提取试剂盒
英文名称:
Total Protein Extraction Kit
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:

本试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,作用较为温和,可快速获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。



产品组成:
组分50T100T保存
裂解液(中)50mL100mL2~8℃
磷酸酶抑制剂(100×)0.5mL1mL-20℃
蛋白酶抑制剂(100×)0.5mL1mL
PMSF (100×)0.5mL1mL

保存:-20℃,有效期1年。

注意事项:
  • 实验过程用到所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境。
  • PMSF毒性低于DFP,需现用现加,因为PMSF在水溶液中会快速降解。


使用方法:
在1mL的冷裂解液中各加入10μL的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF;混匀,放置在冰上备用。
  • 组织总蛋白的提取
    • 称取0.1g的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然后加入0.5~1mL的新配制的裂解液,研磨直至没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作。
    • 将组织匀浆液移入1.5mL的EP管中,4℃,12000g离心30min。
    • 吸取上清至新的管中。
    • 进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
      提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。
  • 细胞总蛋白的提取
    • 裂解液的用量:107个细胞需要裂解液1mL。
    • 贴壁细胞:弃去培养基,用冷的PBS洗两次,弃去PBS,然后加入计算好的细胞裂解液;在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞,将刮离的细胞裂解液移入EP管中,颠倒裂解20~30min。
    • 悬浮细胞:4℃,400g离心收集细胞,用冷的PBS洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液,涡旋10s,放置冰上裂解10min,重复3~4次。
    • 裂解完毕之后,将细胞裂解液4℃,12000g离心30min。
    • 将上清移入新的EP管中;进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
      提取好的蛋白建议保存于-80°℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。

相关搜索:总蛋白提取试剂盒总蛋白提取全蛋白提取Total Protein Extraction Kit
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